viernes, 17 de octubre de 2014

Cromatografia.

CROMATOGRAFIA.

La cromatografía es uno de los principales métodos para la separación de especies química estrechamente relacionadas en mezclas complejas. La cromatografía es un método físico de separación basado en la distribución de los componentes de una mezcla entre dos fases inmiscibles, una fija o estacionaria y otra móvil.
En todos separaciones cromatograficas la muestra se disuelve en una fase móvil que puede ser un gas un líquido o un fluido supercrítico. Esta fase móvil se hace pasar a través de una fase estacionaria inmiscible, la cual se mantiene fija en una columna o sobre una superficie sólida. Las fases se eligen de tal forma que los componentes de la muestra se distribuyen de modo distinto entre la fase móvil y la fase estacionaria.
La cromatografía puede cumplir dos funciones básicas que no se excluyen mutuamente:
-       Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlo más puros y que puedan ser usados posteriormente (etapa final muchas síntesis).
-       Medir la proporción de los componentes de la mezcla (finalidad analítica). En este caso, las cantidades de material empleadas son pequeñas.

Clasificación de los métodos de separación de cromatografía.

Las distintas técnicas cromatograficas se pueden dividir según como esté dispuesta la fase estacionaria:

-       Cromatografía plana, la fase estacionaria se sitúa sobre una placa plana p sobre un papel.  Las principales técnicas son:

-       Cromatografía en papel.

-       Cromatografía en capa fina.

Cromatografía en columna, la fase estacionaria se sitúa dentro de una columna. Según el fluido empleado como fase móvil se distinguen:

-       Cromatografía de líquidos.

         Cromatografía de gases

-       Cromatografía de fluidos supercríticos.
a   aquí podemos observar un pequeño video de cromatografia.



lunes, 13 de octubre de 2014

espectrofotometria.

ESPECTROFOTOMETRIA.

Muchas técnicas analíticas que se emplean en laboratorios de química clínica incorporan los principios de instrumentación espectrofotométrica. La espectrofotometría se utilizan los patrones característicos de absorbancia  de radiación electromagnética para identificar los analitos de interés. Cuando se conoce el patrón espectral se usa la longitud de onda luminosa la cual la absorbancia es máxima, cuantificar dicha sustancia en solución.

Características de la luz.

Debido que la espectrofotometría comprende mediciones con detectores de la radiación electromagnética que se trasmite, es fundamental conocer las principales características de la radiación electromagnética, la luz es una forma visible de radiación electromagnética; o sea que se comporta como si tuviera campos eléctricos y magnéticos oscilados en planos perpendiculares entre si.

Características de la longitud de onda.

La luz, como toda radiación electromagnética, está formada de fotones o paquetes de energía (E) que viajan en ondas. El espectro electromagnético se describe en términos de longitud de onda.
La longitud de onda del espectro electromagnético es la distancia entre los máximos de ondas sucesoras. En el sistema internacional se mide en nanómetros (nm), el número de ondas por el segundo se denomina frecuencia. La longitud de onda se relaciona inmensamente con la energía, mientras mayor es la longitud de onda es menor el número de fotones que contiene. En otras palabras la longitud de onda larga es de baja energía, de manera similar la longitud de onda corta posee más energía.
Espectro electromagnético.

Es el rango de todas las radiaciones electromagnéticas posibles. El espectro de un objeto es la distribución característica de la radiación electromagnética de ese objeto.

El espectro electromagnético se extiende desde las bajas frecuencias usadas para la radio moderna (extremo de la onda larga) hasta los rayos gamma (extremo de la onda corta), que cubren longitudes de onda de entre miles de kilómetros y la fracción del tamaño de un átomo. Se piensa que el límite de la longitud de onda corta está en las cercanías de la longitud Planck, mientras que el límite de la longitud de onda larga es el tamaño del universo mismo, aunque en principio el espectro sea infinito y continuo.
Espectro ultravioleta.

La región UV se define como el rango de longitudes de onda de 195 a 380nm. Posee una región de energía muy alta, provoca daños al ojo humano, la región UV es importante para la determinación cualitativa y cuantitativa de compuestos orgánicos.

Espectro visible.

Se describe como el rango de longitudes de ondas visibles a simple vista. Esta región va de 380 a 700 nm, se obtiene un espectro continuo con un color visible distinto que corresponde a determinada porción de longitud de onda.
El color visible de una solución corresponde a la longitud de onda que trasmite, no que se absorbe, el color que se absorbe es el complementario del color que se trasmite, por tanto, para efectuar mediciones de absorción es necesario utilizar longitud de onda a la cual la solución colorida absorbe luz.
 
Radiación infrarroja.
Se emplea sobre todo en análisis toxicológicos.

 Ley de Beer.

La mayoría de las medidas espectrofotométricas se basan en la ley de Beer, la concentración de una sustancia es directamente proporcional a la cantidad de luz absorbida, e inversamente proporcional al logaritmo de la luz trasmitida y se expresa matemáticamente así.
A = a.b.c. = 2 – log % T donde:
A = absorbancia.
a = absortividad o coeficiente de absorción.
b = longitud de paso de la luz en centímetros.
c = concentración de la sustancia en interés.
%T = porcentaje de transmitancia.

Absorbancia.

Este compuesto es sinónimo de densidad óptica, se define como la cantidad de energía radiante que una sustancia absorbe a determinada longitud de onda.

Transmitancia.

Es la cantidad de energía radiante que trasmite o deja pasar una sustancia a una determinada longitud de onda.
Espectrofotometría:
Es la medición de la intensidad de la energía radiante en estrecho intervalo de longitud de onda del espectro. Para la selección de la longitud de onda se utilizan rejillas de difracción o prisma.
Fotometría
Es el procedimiento por el cual se efectúan mediciones de energía radiante utilizando filtro para aislar parte del espectro.

Pruebas colorimétricas.

Blanco reactivo
.
Casi todos los reactivos poseen una coloración que tendrán una absorbancia que tienen que ver con el color original que este trae, por lo tanto necesitamos eliminarla para no aumentar la absorbancia de la muestra. Así que sirve para eliminar la absorbancia propia del reactivo, esta resta puede realizarse de manera manual o automáticamente con el fotocolorímetro o espectrofotómetro.

Blanco de muestra.

Es un tubo que se monta utilizando agua destilada y se usa para eliminar la absorbancia propia de la muestra en los casos que se esta presente, hemolisis, ictericia o lipemia.

Blanco de aire.

Es realizarle un cero de absorbancia al equipo para eliminar cualquier inferencia.

Estándar.

Es una solución patrón que tiene una concentración conocida de un determinado metabolito y se utiliza para comparar su color con el de la muestra, y lo más importante, para calcular la concentración del metabolito en estudio en la muestra examinada, a través de la siguiente formula en la ley de Beer.


Concentración        = absorbancia de la muestra          
De la muestra            …………………………………..     X  la concen del estándar.
                                     Absorbancia del estándar.




miércoles, 10 de septiembre de 2014

Toma de muestra.



Toma de Muestra Sanguínea.


Es el  procedimiento que permite acceder al torrente sanguíneo para extraer una pequeña muestra de sangre, que será utilizada en diversas pruebas.
















Podemos obtener dos tipos de muestra la venosa y la arterial.

La sangre venosa: las sustancias a analizar están adecuadamente solubles y dispersas.

La sangre arterial: son útil en medir pO2, pCO2 y pH del plasma.

La toma de muestra es útil para medir los componentes de la sangre, determinar el tipo de sangre de un paciente y monitorizar de un cliente a una terapia.

Preparación de materiales.

Guantes
Tapaboca.
Gradilla.
Jeringa 5ml
Torniquete
Tubos de ensayo al vacío.
Alcohol al 70%
Algodón
Esparadrapo
Agujas.

Agujas 




Preparación del paciente.

Ayuno del paciente.
Posición del paciente
Ejercicio muscular.


Venas más utilizadas.





















 Sitios de punción.

Cuero cabelludo: venas superficiales del cráneo.
Cuello: yugular externa
Axila: vena axilar
Fosa anti cubital: vena basílica, cefálica, mediana.
Antebrazo: vena radial, cubital, mediana.
Mano: venas dorsales de la mano.
Tobillo: safena interna, externa.
Pie: venas dorsales del pie.

Obtención de la muestra.

° ligar el brazo aproximadamente 4 dedos encima de la flexión del codo.
° Ajustar bien alrededor del paciente.
° palpar la vena con el dedo, escoger la que se pueda palpar, el paciente deberá cerrar la mano ayudando a visualizar las venas superficiales.
° Limpiar la zona con alcohol al 70% con movimientos circulares, desde el centro de la zona hacia afuera y dejar sacar la piel.
° no tocar el área una vez desinfectada.
° introducir la aguja formando un angulo de aproximadamente 45°  brazo – aguja y con bisel hacia arriba.
° retirar la ligadura.
° colocar algodón seco donde se a ingresado la aguja a la vena.
° pedirle al paciente que deje de ser puño y que presione el algodón con el brazo extendido
° verificar el estado del paciente.





Materiales y Equipo de laboratorios

Materiales y Equipos de laboratorios.
El material de laboratorio se refiere a aquellos que se emplean en distintos tipos de laboratorios sea este clínico, de biología molecular, de investigación, patología, que estos se compone de diversos instrumentos que cumplen con funciones determinadas.
El material de laboratorio puede construirse con componentes muy variados, ya que se encuentran hechos de vidrio, de metal, de plástico, goma, madera también existen los equipos como los de la centrifugación los instrumentos de análisis etc, estas características del material dependerán de su función, ya que la manipulación de ciertos productos y procesos químicos implican riesgo, entre las herramientas más habituales que se utilizan en el laboratorio se encuentran las pipetas, los tubos de ensayo, la probeta, el microscopio, la centrifuga, la micro centrifuga etc. 

Materiales de laboratorio.

Tubos de ensayo: El tubo de ensayo forma parte del material de vidrio de un laboratorio químico. Y es el principal material que conlleva la preparación de soluciones o la toma de muestras que luego serán depositadas en él, sirve para calentar durante intervalos cortos a llama directa puede sostenerse el tubo con la mano mediante su parte superior.
La pipeta: es un instrumento volumétrico que se usa en el laboratorio para medir volúmenes de líquidos con gran precisión y exactitud.
La bureta: es un instrumento de laboratorio que se utiliza en volumetría para medir con gran precisión  el volumen de líquido vertido.

La probeta es también llamada cilindro graduada. Es un instrumento de medición volumétrico, generalmente hecho de vidrio (también puede encontrarse de plástico).
Material de calefacción: son materiales en los que se combinan las sustancias están fabricadas con vidrio óptico o vidrio duro, estos debido a su composición son muy resistentes a la acción de los reactivos químicos y cambios bruscos de la temperatura.


Cristalizador 
Balon
Beaker
Mechero

Materiales de soporte: son utensilios que permiten sujetar otras piezas de laboratorio, con estos materiales se realizan diversos montajes de laboratorio.


Pinzas

Gradilla









Gradilla

Trípode



Equipos de laboratorio.

Microscopio: El microscopio nos permite ver microorganismo imposible de ver a simple vista por ser estos tan diminutos, hay dos tipos de microscopio uno electrónico y el otro es el óptico que es el más usado.






El autoclave es un dispositivo que sirve para esterilizar material de laboratorio, utilizando agua a alta presión y temperatura, el fundamento del autoclave es que coagula las proteínas de microorganismos debido a la presión de temperatura, es un instrumento habitualmente utilizado en los laboratorios de microbiología.




El espectrofotómetro es capaz de trabajar, no solo con la luz visible sino que en otras regiones del espectro electromagnético (ultravioleta e infrarroja).







La centrifuga.








miércoles, 27 de agosto de 2014

BIOSEGURIDAD

BIOSEGURIDAD
• Es el conjunto de medidas preventivas que tienen como objetivo proteger la salud y la seguridad del personal, de los pacientes y de la comunidad frente a diferentes riesgos producidos por agentes biológicos, físicos, químicos y mecánicos.
Logrando la prevención de riesgos propios de sus actividades diarias, asegurándose que dichos procedimientos no atenten con la seguridad de los trabajadores de la salud, pacientes etc.
Riesgo Biológico.
Es a posible exposición a microorganismos que puedan dar lugar a enfermedades, motivada por la actividad laboral. Su transmisión puede ser por vía respiratoria, digestiva, sanguínea, piel o mucosas.
Constituye uno de los principales riesgos laborales a que están expuestos los trabajadores de Centros Sanitarios, afectando a todas las categorías. Están especialmente expuestos a la transmisión por vía sanguínea por los profesionales de enfermería, médicos y el personal de limpieza y lavandería.
Riesgo químico.

El riesgo químico es aquel riesgo susceptible de ser producido por una exposición no controlada a agentes químicos la cual puede producir efectos agudos o crónicos y aparición de enfermedades. Los productos químicos tóxicos también pueden provocar consecuencias locales y sistemáticas según la naturaleza del producto y la vía de exposición.
Hoy en día, casi todos los trabajadores están expuestos a algún tipo de riesgo químico porque se utilizan productos químicos en casi todas las ramas de la industria. De hecho los riesgos químicos son los más graves.
Vías de penetración: inhalación, absorción cutánea, ingestión.


Riesgos eléctricos.

·         Utilizar cables de tres conductos (con polo a tierra).
·         Todos los cables de la instalación eléctrica deben estar en buen estado,      sin desgaste, no utilizar  extensiones.
·         Se deben utilizar siempre  tomas de corriente de un sólo enchufe, en vez de  tomas múltiples.           
·         Los interruptores deben estar marcados  o rotulados y en lugar fácilmente                 accesible.

Prevención de incendios en el laboratorio

·         Poseer un sistema de alarma  inspeccionado periódicamente.
·         Todas las salidas deben:
Estar libres a fin de que el personal pueda abandonar sin dificultad todos los sitios del laboratorio, bien iluminadas, identificadas y en lo posible conducir directamente  a la calle, patio o cualquier espacio abierto.
·         Debe existir un sistema funcional de detección de incendios.
·         Los extinguidores portátiles de incendios deben permanecer cargados, en buen estado de funcionamiento y siempre colocados en los lugares previstos y debidamente  señalizados.

Protección personal

1. Se usarán en todo momento monos, batas o uniformes especiales para el trabajo en el laboratorio.
2. Se usarán guantes protectores apropiados para todos los procedimientos que
puedan entrañar contacto directo o accidental con sangre, líquidos corporales y
otros materiales potencialmente infecciosos o animales infectados. Una vez utilizados, los guantes se retirarán de forma aséptica y a continuación se lavarán las
manos.
3. El personal deberá lavarse las manos después de manipular materiales y animales infecciosos, así como antes de abandonar las zonas de trabajo del laboratorio.
4. Se usarán gafas de seguridad, viseras u otros dispositivos de protección cuando
sea necesario proteger los ojos y el rostro de salpicaduras, impactos y fuentes de
radiación ultravioleta artificial.
5. Estará prohibido usar las prendas protectoras fuera del laboratorio, por ejemplo
en cantinas, cafeterías, oficinas, bibliotecas, salas para el personal y baños.
6. No se usará calzado sin puntera.
7. En las zonas de trabajo estará prohibido comer, beber, fumar, aplicar cosméticos o manipular lentes de contacto.
8. Estará prohibido almacenar alimentos o bebidas para consumo humano en las
zonas de trabajo del laboratorio.
9. La ropa protectora de laboratorio no se guardará en los mismos armarios o taquillas que la ropa de calle.

 Infraestructura del laboratorio
·         Mantener ordenado y en buen estado de  higiene las áreas del laboratorio.              
·         Tener suficientes  recipientes para la basura en lo posible con tapa.
·         Mantener erradicados roedores, insectos y otras plagas.
·         Los pasillos y escaleras deben permanecer limpios, secos y libres de cualquier clase de obstáculos.   
·         Los  pisos  de las áreas de trabajo  deben estar exentos de elementos                salientes,  astillas,  agujeros o  trozos  de  madera  sueltos  y  no   ser                resbalosos.
·         Los pasillos deben ser lo suficientemente anchos para que puedan desplazarse los equipos de bioseguridad e incendios.     
·         Todas las escaleras deben tener barandillas o pasamanos y sus peldaños                 deben ser uniformes y antideslizantes


REGLAS  DE  BIOSEGURIDAD  MÁS  IMPORTANTES  PARA  EL LABORATORIO CLINICO.


 Usar siempre el equipo de protección personal.

 El personal de laboratorio se debe lavar las manos antes de manipular cualquier material y después de utilizarlos.

No comer, beber, fumar, almacenar alimentos y aplicarse cosméticos en el área de trabajo.

No ingresar animales al laboratorio.

No ingresar niños al área de trabajo.





ELIMINACIÓN DE DESECHOS


Caneca roja: van los residuos peligrosos infecciosos, se deposita  los guantes, jeringas, materiales de curación, además residuos orgánicos o inorgánicos, corrosivos, toxico o inflamable.





Caneca verde: en esta caneca se colocan los residuos ordinarios ya que son aquellos que no se pueden reciclar como el papel sucio, embaces de comida, servilletas etc.






Caneca gris: aquí se deposita los residuos que son reciclaje como el papel, cartón etc.